Omegawave OZ-2激光散斑血流成像儀探究大鼠口面部組織血流量變化

北海道健康科學大學牙口腔生物學系生理學分部的Hanako Ohke團隊在《The Journal of Physiological Sciences》期刊上發(fā)表了一項研究。該研究旨在探討三叉神經(jīng)傳入介導的副交感神經(jīng)血管舒張與頸上交感干（CST）誘導的交感神經(jīng)血管收縮對口面部（重點為下唇）血流（BF）和局部溫度（Tm）的影響，深入分析其潛在作用機制及兩者間的相互作用。

摘要

口面部的皮膚溫度（Tm）會影響口面部功能，且與血流量（BF）相關(guān)。由副交感神經(jīng)血管舒張介導的血流量增加可能對口面部溫度調(diào)節(jié)具有重要意義。因此，本研究在麻醉大鼠中探究了副交感神經(jīng)反射性血管舒張與口面部溫度之間的關(guān)系。電刺激舌神經(jīng)（LN）的中樞切斷端可增加下唇的血流量和溫度，而六甲銨能減弱這種增加效應(yīng)，阿托品則無此作用。血管活性腸肽（VIP）激動劑可同時增加下唇的血流量和溫度。激活頸上交感干（CST）會降低下唇的血流量和溫度，但這種降低效應(yīng)會被舌神經(jīng)刺激抑制。研究結(jié)果表明，副交感神經(jīng)血管舒張在維持口面部血流動力學和溫度方面發(fā)揮著重要作用，且VIP可能參與了這一反應(yīng)過程。

關(guān)鍵詞：副交感神經(jīng)反射性血管舒張；舌神經(jīng)；頸上交感干；血管活性腸肽；皮膚溫度

實驗材料與儀器

（一）實驗材料

1. 實驗動物：42只成年雄性Wistar大鼠

2. 藥物：異氟醚、烏拉坦、泮庫溴銨、六甲銨溴化物、硫酸阿托品、VIP激動劑AGP-8633、乙酰膽堿溴化物、無菌生理鹽水

（二）實驗儀器

Omegawave OZ-1激光散斑血流成像儀、非接觸式溫度計、電刺激器、壓力傳感器、紅外分析儀、呼吸機、數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)、注射器泵、雙目顯微鏡

Omegawave OZ-EX1激光散斑血流成像儀

實驗過程

1. 動物準備：采用異氟醚誘導麻醉后，大鼠背部皮下注射烏拉坦維持麻醉。動物行氣管插管，靜脈注射泮庫溴銨后，用50%空氣和50%氧氣的混合氣體進行人工通氣，維持呼氣末二氧化碳濃度在40-45mmHg。麻醉深度通過夾捏腳趾2秒無屈曲反應(yīng)、無傷害性刺激誘發(fā)的SABP反射性升高來判斷，必要時補充烏拉坦。

2. 心血管參數(shù)和局部溫度測量：通過Omegawave OZ-1激光散斑血流成像儀采集下唇和左足背皮膚的血流量圖像，軟件分析感興趣區(qū)域（ROI）的平均血流量信號（以任意單位a.u.表示）；非接觸式溫度計測量下唇局部溫度。

Omegawave OZ-EX1激光散斑血流成像儀

左側(cè)神經(jīng)（LN）中樞端切斷后，對其進行電刺激前后，下唇、足背皮膚及平均動脈血壓（SABP） 的血流量（BF）、血管傳導性（VC） 和皮膚溫度（Tm） 變化情況

3. 神經(jīng)電刺激：在雙目顯微鏡下單側(cè)刺激舌神經(jīng)的中樞切斷端和頸上交感干的外周切斷端，單獨刺激或聯(lián)合刺激。刺激前雙側(cè)切斷頸部迷走神經(jīng)和頸上交感干，以確保僅檢測非迷走性副交感神經(jīng)效應(yīng)。

4. 藥物干預(yù)：藥物通過注射器泵靜脈灌注10min，給藥后至少10min再進行電刺激，以確保血流量和SABP達到穩(wěn)定狀態(tài)。以藥物干預(yù)前的反應(yīng)為對照，計算干預(yù)后反應(yīng)的百分比。

實驗結(jié)論

1. 電刺激舌神經(jīng)中樞切斷端可頻率依賴性（≥5Hz）增加同側(cè)下唇的血流量、血管傳導性和局部溫度，對 contralateral 下唇及足背皮膚無影響，且該效應(yīng)與SABP和HR變化無關(guān)，主要由副交感神經(jīng)反射性血管舒張介導。

2. 六甲銨可抑制舌神經(jīng)刺激誘導的下唇血流量和溫度升高，而阿托品無此作用，提示該副交感神經(jīng)血管舒張為非膽堿能介導的反應(yīng)。

3. VIP激動劑可劑量依賴性增加下唇血流量、血管傳導性和局部溫度，結(jié)合VIP在相關(guān)神經(jīng)節(jié)和血管支配神經(jīng)纖維中的表達證據(jù)，提示VIP可能參與了口面部非膽堿能副交感神經(jīng)血管舒張反應(yīng)。

4. 電刺激頸上交感干外周切斷端可頻率依賴性（≥1-2Hz）降低同側(cè)下唇的血流量、血管傳導性和局部溫度，該效應(yīng)為交感神經(jīng)血管收縮所致，與SABP和HR變化無關(guān)。

5. 舌神經(jīng)刺激可抑制頸上交感干刺激誘導的下唇血流量和溫度降低，表明三叉神經(jīng)傳入介導的副交感神經(jīng)反射性血管舒張可補償由交感神經(jīng)活動增強引起的口面部血流灌注不足和溫度下降，在維持口面部血流動力學和溫度穩(wěn)定中發(fā)揮重要作用。

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